在細(xì)胞生物學(xué)研究中，難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系往往是科研進(jìn)程的 “攔路虎"。從常出現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率不足 10% 的血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞系，到對傳統(tǒng)試劑高度耐受的神經(jīng)細(xì)胞系等，這些細(xì)胞憑借特殊的生理結(jié)構(gòu)與代謝機(jī)制，讓許多科研人員在基因遞送環(huán)節(jié)屢屢碰壁。而今天要為大家介紹的 ProteanFect®正是專為攻克這類 “頑固" 細(xì)胞系而生的創(chuàng)新工具，更有關(guān)于在轉(zhuǎn)染過程中 “是否添加試劑 C" 的關(guān)鍵疑問解答，助力你的實(shí)驗(yàn)效率翻倍！

一、難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的 “痛點(diǎn)"， ProteanFect®精準(zhǔn)擊破！

難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染難題，主要源于三大核心障礙：細(xì)胞膜屏障堅固，胞內(nèi)降解機(jī)制活躍，細(xì)胞毒性敏感。傳統(tǒng)脂質(zhì)體、病毒載體常導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，尤其對腫瘤細(xì)胞系、原代衍生細(xì)胞系影響顯著。而 ProteanFect®通過全·球首·創(chuàng)的自組裝蛋白納米顆粒技術(shù)，從根源上解決了這些問題。它利用哺乳動物內(nèi)源蛋白與核酸自組裝形成的凝聚體，模擬細(xì)胞內(nèi)部天然的轉(zhuǎn)運(yùn)與調(diào)控機(jī)制。進(jìn)入細(xì)胞后，凝聚體能順利被內(nèi)吞、精準(zhǔn)釋放核酸，并最終通過細(xì)胞代謝自然清除載體蛋白。與傳統(tǒng)脂質(zhì)體或病毒載體不同，ProteanFect®并不“強(qiáng)行闖入"，而是借助細(xì)胞“熟悉"的方式完成轉(zhuǎn)染，從而在高效率與低毒性之間實(shí)現(xiàn)了難得的平衡。

二、實(shí)測數(shù)據(jù)說話：ProteanFect®在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中的 “硬實(shí)力"

為驗(yàn)證ProteanFect®對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效果，西湖凝聚體科研團(tuán)隊針對此類典型難轉(zhuǎn)細(xì)胞系進(jìn)行系列驗(yàn)證結(jié)果令人驚艷。以 Jurkat T 細(xì)胞轉(zhuǎn)染為例，轉(zhuǎn)染 GFP-mRNA和GFP質(zhì)粒后，48 小時內(nèi)熒光陽性細(xì)胞比例可高達(dá) 50%-80% ；相比傳統(tǒng)脂質(zhì)體試劑，轉(zhuǎn)染效率顯著提升。這一數(shù)據(jù)體現(xiàn)了ProteanFect®對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的高效轉(zhuǎn)染。

三、關(guān)鍵疑問：針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系，是否需要加試劑 C？

在使用 ProteanFect® 時，許多科研人員會糾結(jié)于配套的試劑C是否必要？ 答案并非 “一刀切"，可根據(jù)細(xì)胞系類型進(jìn)行探索。試劑C能提升轉(zhuǎn)染效率，尤其對原代細(xì)胞和一些難轉(zhuǎn)細(xì)胞系效·果顯·著。我們已驗(yàn)證部分細(xì)胞系是否需要添加試劑C，詳見附表。

對于未驗(yàn)證的細(xì)胞，建議實(shí)驗(yàn)測試。具體操作為：不加試劑C，轉(zhuǎn)染復(fù)合物需和細(xì)胞孵育45分鐘；加試劑C則需加入8微升，與細(xì)胞孵育30分鐘即可。最終轉(zhuǎn)染方案應(yīng)綜合轉(zhuǎn)染后細(xì)胞活力和效率確定。

四、操作小貼士：讓 ProteanFect®在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中發(fā)揮最佳效果

1. 核酸質(zhì)量把控：轉(zhuǎn)染前需確保 DNA 無內(nèi)毒素（建議使用無內(nèi)毒素試劑盒提?。?，OD260/280 值在 1.7-1.9 之間；mRNA 需無 DNA 污染，且完整性良好。

2. 細(xì)胞狀態(tài)準(zhǔn)備：轉(zhuǎn)染前 1 天更換新鮮培養(yǎng)基，確保細(xì)胞密度處于對數(shù)生長期，新復(fù)蘇的細(xì)胞需傳代 2-3 次后再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

結(jié)語

面對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的 “刁難"，ProteanFect®憑借創(chuàng)新的蛋白納米顆粒技術(shù)，打破了傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑的局限，為科研人員提供了高效、低毒的轉(zhuǎn)染解決方案。如果你正在為 Jurkat T、K562、SH-SY5Y 等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)發(fā)愁，不妨試試 ProteanFect®—— 讓 “難轉(zhuǎn)染" 不再成為科研路上的絆腳石！ 

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