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在免疫印跡實驗中遇到的質(zhì)控問題之一最常見的就是高背景。當一個高的背景發(fā)生時，很難從不相關的數(shù)據(jù)中區(qū)分出相關的數(shù)據(jù)。一個常見的高背景可以由于很多原因?qū)е峦瑫r需要一些工作來解決--因為不解決這些問題，這個印跡無法讀取.保證緩沖液沒有被污染一個被污染的緩沖液在免疫印跡中很容易導致高的背景。大多數(shù)情況下，由...

在生物化學中，透析是在大分子樣本溶液中通過選擇性和被動擴散的原理分離小分子和不想要的化合物的過程。通常來說，樣品和緩沖液溶液（透析液）放到膜的相反面上。因為透析通過擴散發(fā)生作用，分子會自然的從高濃度到低濃度區(qū)域進行移動直到達到平衡點。從而協(xié)助樣品和透析液分子的分離。因為大分子不能通過膜孔徑，他們會在...

質(zhì)量差的蛋白轉印在免疫印跡的過程中會導致要么比較弱的信號要么沒有信號.盡管質(zhì)量差的蛋白轉印時有發(fā)生，科學家們通常不把它作為一個免疫印跡實驗失敗的原因。因此，當需要排除質(zhì)量差的信號的原因時轉膜的質(zhì)量好壞需要首先被考慮.導致轉膜差的原因質(zhì)量差的蛋白轉印可能發(fā)生在抗原水平低的情況下。這種情況的發(fā)生通常是因...

當?shù)孜锇l(fā)生化學反應而產(chǎn)生的能量以光的形式釋放出來的時候，我們稱這個過程為化學發(fā)光。魯米諾（luminol）是常用的化學發(fā)光試劑之一，被過氧化物氧化后它會產(chǎn)生一種激發(fā)態(tài)的產(chǎn)物——aminophthalate。這種產(chǎn)物衰變至低能態(tài)的同時釋放出光子。添加物可以提高魯米諾反應的發(fā)光強度和持續(xù)時間以及靈敏度。...

用層析法，電泳法，免疫化學的方法對蛋白樣本進行分離或分析前通常需要先進行蛋白定量。用比色法進行蛋白定量分析的試劑通常分為兩類：一類是間接檢測法，即檢測與蛋白螯合后被還原銅離子；另一類是直接檢測法，即使用與蛋白結合的染料，檢測樣品中顏色的變化。所有的檢測方法都要適用于應用的適用性。每種檢測方法都有它的...

蛋白樣品制備中，在細胞破碎之后，既可以利用特定蛋白質(zhì)的特性來分離某一類蛋白質(zhì)，比如親和純化，比如前面介紹的磷酸化蛋白富集，或者膜蛋白富集；另外一個考慮方向是去除雜質(zhì)----去掉樣品中某些非目標高豐度蛋白或者雜質(zhì)的干擾，同樣可以達到簡化樣本的目的。當然要小心“倒洗腳水的時候別把嬰兒也倒掉了”，一定要選...